ＦＩＳＨ法によるヒトゲノムマッピング

高橋永一

目標

　この研究では、遺伝子あるいは染色体特異的DNAマーカーを染色体上に位置づける（細胞遺伝学的地図作製、マッピング）ことを目的とし、

• そのための蛍光in situ ハイブリダイゼーション（FISH）を基盤とした染色体バンド上への直接的マッピング法の開発　
• この方法による遺伝子および染色体特異的コスミドクローンのマッピング を行っております。 　この方法により作製された地図は、ヒトゲノムの構造（DNA配列）と機能を解析するた めの重要な足掛かりとなります。更に、遺伝性疾患や癌に関連した原因遺伝子の単離にも多大の貢献をします。

• 複製R-バンドとFISHを組み合わせた直接的マッピング法(direct R-banding FISH)を開 発したことによって、迅速に正確なマッピングが可能となりました（右図）。
• ヒト３番染色体について、コスミドクローンの平均マップ距離が0.5Mbレベルの高精度 の地図を作製しました（左図）。また５番、１２番染色体についても同様に行いました。

  　今後はその他の染色体についても、同方法によりマッピングを行います。また、多色>FISH法やCCDカメラなどの新しい技術を導入して、より詳細な地図を作製する予定でおります。そして、これを基にして遺伝子の単離を試みます。

  

  図の解説

  　ヒト３番染色体特異的コスミドクローンをマップした例。矢印はＲーバンド上のシグナルを示します（右図）。 左図はその細胞遺伝学的地図、番号はクローンの番号を、バーはその位置を示しています。

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  参考文献

  高橋永一：蛍光in situ ハイブリダイゼーション(FISH)法によるマッピング．（１９９２）実験医学別冊「細胞工学ハンドブック」１１１ー１１４

  山川和弘、高橋永一、中村祐輔：ヒト第３番染色体のマッピングと疾患遺伝子単離への応用．（１９９３）　　　　　蛋白質核酸酵素増刊　「ゲノム解析研究」　３８、２１５ー２２７

  高橋永一、堀雅明：Direct R-banding fluorescence in situ ハイブリダイゼーション法によるヒトゲノムマッピング．（１９９３）蛋白質核酸酵素増刊「ゲノム解析研究」３８、５５１ー５５７